生物樣品的**凍存取決于冷凍的速率，**的溫度控制和合理的溫度梯度（+50℃
-180℃）。當溫度降至-180℃時，大部分生物樣品可轉移至液氮中長期保存。
在細胞凍存的過程中，液態水轉化為冰，細胞代謝停止。同時，水分也隨之散失，導致細胞內鹽、代謝物濃度改變，進而造成滲透壓失衡，直接影響凍存細胞的復蘇。同時，冷凍速率太快或太慢，容易導致細胞內水分喪失或形成大冰晶，都不利于細胞存活。通過使用程控降溫儀，選擇合適的凍存液，設定合適的升降溫速率，可有效地克服上述不利因素。實踐證明，（經溫度補嘗后）每分鐘1-3℃的冷凍速率可大大提高凍存細胞的存活率。
